Tiêu hóa là bước đầu tiên để bắt đầu chuyển hóa lipid, và đây là quá trình phá vỡ các chất béo trung tính thành các đơn vị monoglyceride nhỏ hơn với sự trợ giúp của các enzyme lipase. Tiêu hóa chất béo bắt đầu trong miệng thông qua quá trình tiêu hóa hóa học bằng lipase trong miệng. Cholesterol thì không bị phá vỡ bởi lipase và vẫn còn nguyên vẹn cho đến khi nó đi vào các tế bào biểu mô của ruột non. Lipid sau đó tiếp tục đến dạ dày, quá trình biến đổi hóa học tiếp tục với lipase của dạ dày và biến đổi cơ học thì mới bắt đầu (nhu động). Tuy nhiên, phần lớn sự tiêu hóa và hấp thu lipid xảy ra một khi chất béo đi tới ruột non. Chất tiết từ ​​tuyến tụy (lipase tụy và lipase phụ thuộc muối mật) được tiết vào ruột non để giúp phân hủy chất béo trung tính,[10] cùng với quá trình biến đổi cơ học, lipid được biến đổi cho đến khi chúng chỉ còn là các đơn vị axit béo riêng lẻ có thể hấp thu vào tế bào biểu mô ruột non.[11] Lipase tuyến tụy có nhiệm vụ báo hiệu sự thủy phân chất béo trung tính thành các axit béo tự do và các glycerol tự do.